科研服務(wù) 時間：2020-07-17 16:56:00 瀏覽：6922次
人類疾病的動物模型在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究方面占有十分重要的地位。威斯騰生物動物中心經(jīng)過十余年的發(fā)展，累積了豐富的動物培養(yǎng)和模型構(gòu)建經(jīng)驗，在動物模型構(gòu)建方法上摸索出獨有經(jīng)驗，常規(guī)動物模型構(gòu)建平均成功率98%以上，重難點模型（開胸/開顱術(shù)等）構(gòu)建平均成功率75%以上,形成了高效高質(zhì)量的動物模型構(gòu)建方法庫，可成功構(gòu)建上百種疾病動物模型。
大鼠MCAO模型構(gòu)建
動物適應(yīng)性喂養(yǎng)
動物自購回后保持動物房12h-12h晝夜交替，保持動物自由飲水、進(jìn)食，溫度23-25℃，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后進(jìn)入實驗。
大鼠MCAO模型構(gòu)建
參照改良Zea Longa線栓法構(gòu)建大鼠MCAO模型。大鼠術(shù)前12h禁食不禁水。
大鼠稱重，7%水合氯醛（0.5ml/100g）腹腔注射麻醉，頸前部備皮、消毒，行頸正中切口，鈍性分離右側(cè)皮下組織及肌肉暴露出頸總動脈，眼科鑷小心分離伴行于頸總動脈的迷走神經(jīng)及動脈周圍粘膜組織，分離出頸總動脈大約1~1.5cm。繼續(xù)向頭部分離，小心剔除覆蓋于動脈上方的粘膜組織，可見頸外動脈、頸內(nèi)動脈與頸總動脈呈“Y字形”分布，游離出獨立的頸內(nèi)、外動脈。結(jié)扎頸外動脈及頸總動脈近心端，頸內(nèi)動脈埋線并用動脈夾暫時夾閉。在頸總動脈近心端結(jié)扎處剪一“V”形切口，用眼科鑷夾持栓線由頸總動脈進(jìn)入頸內(nèi)動脈，到達(dá)動脈夾時，將埋線稍微拉緊（防止?jié)B血），松開動脈夾，繼續(xù)插入栓線，當(dāng)特制栓線黑色標(biāo)記處到達(dá)Y字形分叉口附近時，此時栓線已進(jìn)入大腦中動脈且不能繼續(xù)前行。
栓線插入完畢后，將預(yù)留的結(jié)扎線拉緊固定。醫(yī)用棉簽清理頸部血塊，縫合皮膚，酒精棉球消毒，將大鼠放回籠子。90min過后，麻醉大鼠，頸部消毒，打開一個小口，用眼科鑷夾住栓線固定處將栓線拔出約1cm實現(xiàn)血流再灌注，剪去多余栓線，逐層縫合。
注意事項：
SD大鼠顱腦損傷模型（Feeney 自由落體法）
實驗鼠稱重，7%水合氯醛麻醉（5ml/kg），頭部備皮，俯臥固定于顱腦損傷儀上。手術(shù)區(qū)酒精棉球消毒，將大鼠頭頂部皮膚矢狀切開，剝離筋膜。以人字縫前3mm、冠狀縫右側(cè)3mm為圓心用顱骨鉆鉆孔并擴(kuò)大骨窗（直徑5mm），鉆孔過程需注意不能損壞硬腦膜，將致傷撞墊輕輕置于骨窗中央的硬腦膜上，用40g的砝碼自20cm高處沿滑桿自由落體落下打擊撞墊（沖擊力為800g·cm），造成大鼠右頂葉局限性腦挫裂傷。骨蠟封窗，縫合頭皮。
| 分子生物學(xué)檢測 | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot 實驗服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 生長因子芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
| 電生理相關(guān)服務(wù) | 動物整體實驗服務(wù) | |
| 膜片鉗實驗 | ||
| 細(xì)胞生物學(xué)檢測 | 高通量測序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學(xué)相關(guān)實驗 |
| Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍(lán)檢測細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細(xì)胞學(xué)實驗 | circleRNA測序 | |
| 細(xì)胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細(xì)胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞生物學(xué)整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞成管實驗 | ||
| 病理檢測 | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等） |
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| 行為學(xué)檢測 | 藥物篩選服務(wù)項目 | 藥效學(xué)評價 |
| 曠場實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評價 |
| 重復(fù)性刻板行為檢測 | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺 | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 動物跑臺檢測 | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺 | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 強(qiáng)迫游泳 | 分子藥理研究平臺 | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評價 |
| 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評價 | |
| 常規(guī)藥物體外篩選 |
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