科研服務(wù) 時(shí)間：2020-07-21 15:36:00 瀏覽：29500次
酵母雙雜交（Yeast two hybrid）技術(shù)是利用酵母遺傳學(xué)方法分析蛋白質(zhì)之間的相互作用，被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)組學(xué)、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和功能基因組學(xué)等領(lǐng)域，已成為分子生物學(xué)研究領(lǐng)域的重要實(shí)驗(yàn)手段。經(jīng)過(guò)不斷的完善和發(fā)展，不但可以檢測(cè)已知蛋白質(zhì)之間的相互作用，更重要的在于還可發(fā)現(xiàn)與已知蛋白相互作用的未知蛋白。
傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng)僅限于核蛋白的互作分析，不能進(jìn)行膜蛋白的研究。DUALmembrane 系統(tǒng)(DUALmembrane system)是基于分離的泛素(split-ubiquitin)介導(dǎo)的膜蛋白酵母雙雜交系統(tǒng)，它提供了不同于常規(guī)酵母雙雜交系統(tǒng)的蛋白體內(nèi)分析方法，使得分析膜蛋白間的互作成為現(xiàn)實(shí)。其主要特點(diǎn)是可以進(jìn)行膜蛋白-膜蛋白、膜蛋白-可溶性蛋白間的互作研究。它既可以用于表達(dá)文庫(kù)的篩選，也可以應(yīng)用于兩個(gè)已知蛋白(其中一個(gè)屬于膜蛋白)間互作關(guān)系的驗(yàn)證。
DUAL membrane系統(tǒng)
在酵母細(xì)胞中，泛素可分為兩部分表達(dá)，即其N端部分（NubI）和C端部分（Cub），后者融合有能啟動(dòng)核內(nèi)報(bào)告基因表達(dá)的LexA蛋白。NubI和Cub-LexA在細(xì)胞中組成可分離的泛素蛋白（[NubI:Cub]-reporter）體系。
DUAL membrane系統(tǒng)技術(shù)特點(diǎn)
任何一種膜蛋白都可以作為誘餌
在細(xì)胞膜上原位檢測(cè)蛋白-蛋白間的相互作用而無(wú)需核定位信號(hào)
使用分離的泛素結(jié)構(gòu)域(NubG/Cub)使得相互作用蛋白質(zhì)之間的空間位阻最小化
蛋白間的互作信號(hào)依賴泛素特異性結(jié)合蛋白(UBPs)剪切人工轉(zhuǎn)錄因子(LexA)啟動(dòng)，而不是靠轉(zhuǎn)錄，因此可以檢測(cè)蛋白自身的轉(zhuǎn)錄激活或抑制序列
威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目
| 分子生物學(xué)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
| 實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動(dòng)物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot 實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測(cè) | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動(dòng)脈硬化模型 |
| 過(guò)表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動(dòng)脈阻塞模型 |
| 過(guò)表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過(guò)敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 生長(zhǎng)因子芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動(dòng)物 | |
| 電生理相關(guān)服務(wù) | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) | |
| 膜片鉗實(shí)驗(yàn) | ||
| 細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè) | 高通量測(cè)序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測(cè)序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測(cè) | LncRNA測(cè)序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測(cè) | 全基因組測(cè)序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測(cè) | RNA-Seq測(cè)序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) | 外顯子測(cè)序 | 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn) |
| Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測(cè)序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測(cè)序 | 小動(dòng)物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測(cè) | 宏基因組測(cè)序 | 核磁共振 |
| 臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測(cè)序 | PET-CT |
| 藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) | circleRNA測(cè)序 | |
| 細(xì)胞粘附性檢測(cè) | 甲基化測(cè)序 | 基因編輯動(dòng)物 |
| 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn) | ||
| 病理檢測(cè) | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測(cè) | 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入 |
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| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等） |
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| 行為學(xué)檢測(cè) | 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 | 藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) | 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 重復(fù)性刻板行為檢測(cè) | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 動(dòng)物跑臺(tái)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 強(qiáng)迫游泳 | 分子藥理研究平臺(tái) | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) | |
| 常規(guī)藥物體外篩選 |
【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、病理學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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